核酸檢測PCR實(shí)驗
一、PCR實(shí)驗室為負壓實(shí)驗室,無(wú)潔凈度要求;現考慮用于新冠肺炎的核酸檢測實(shí)驗室,要求進(jìn)一步提高,P2實(shí)驗室,P3用;全新風(fēng)預處理凈化,單獨排風(fēng),防止交叉感染;
1、PCR 實(shí)驗室依據所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實(shí)驗室,有上述前面三個(gè)區域即可。各區域應完全獨立分隔,不應有任何的空氣直通。
2、標準的PCR實(shí)驗室產(chǎn)物分析區或三個(gè)區域的最后一個(gè)區域(即擴增及產(chǎn)物分析區),空氣流向應由室外向室內,可通過(guò)在室內設置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統達到空氣流由室外向室內流動(dòng)的要求。
二、 PCR實(shí)驗室各區域儀器設備配備通常如下:
1、標準的PCR實(shí)驗室試劑準備區: 儀器設備主要應有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動(dòng)紫外燈等??墒褂贸瑑艄ぷ髋_作為試劑配制操作臺面。
2、標準的PCR實(shí)驗室標本制備區儀器設備主要應有生物安全柜(最好為B2, 可避免提取核酸在柜內反復循環(huán),造成標本間交叉“污染”,出現假陽(yáng)性結果。
此外還應配備加樣器、臺式高速離心機(冷凍及常溫)、臺式低速離心機、恒溫設備(水浴和干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。
3、標準的PCR實(shí)驗室擴增區主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀(PCR儀,實(shí)時(shí)熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應專(zhuān)用,并配備一個(gè)穩壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動(dòng)對擴增測定的影響。此外,根據工作需要,還可配備加樣器、超凈臺等。
4、標準的PCR實(shí)驗室產(chǎn)物分析區:本區所使用的儀器設備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。在理想情況下,PCR實(shí)驗室試劑準備、標本制備、擴增三個(gè)區域可設置緩沖間。在緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。